Hvad er celler transfektion og hvad er de forskellige transfektionsfremgangsmåder?

celletransfektion

Processen med bevidst indføring af nukleinsyrer, såsom deoxyribonukleinsyre (DNA) eller ribonukleinsyre (RNA) i eukaryote celler er kendt som transfektion, når den udføres i pattedyrcelle. Den samme fremgangsmåde omtales som Transformation, når de udføres på bakterier, planter, svampe og alger. Transfektion er meget nyttig proces, der anvendes i undersøgelsen af ​​gener og udtænke strategier i forbindelse med gener terapi.

Processen med transfektion typisk indebærer åbning forbigående huller i modtagerens cellemembranen med henblik på at gøre det muligt for accept af materialet. Proteiner eller ydre genetiske materiale fødes ind gennem disse åbninger, og de transficerede celler er tegnet i at smelte fremmed materiale med deres eget stof. Således Transfektion ved elektroporering af calciumphosphat eller gennem integration af kationisk lipid med materialet for at fremstille liposomer, som blander sig med cellemembranen og deponere deres last inde.

Cell transfektion henviser således til genet leveringsmetode som indfører fremmed DNA i cellen. Sygdomme som hjertesygdomme, aids, fedme og kræft kræver genetiske behandlinger, som kan udvikles ved hjælp af transfektionsmetoder. Denne teknik bruges af forskerne for at skabe transgene dyr, og også til at hæve bedre sorter af selskabsdyr, planter, blomster og frugter.

Arten af ​​Cell transfektion kan enten være forbigående eller stabil. Når cellen eliminerer den indførte fremmede DNA, før mitose eller på tidspunktet for mitose, er det nævnt som forbigående celletransfektion. Mens den stabile celletransfektion henviser til den proces, hvor det indførte DNA tilføjer eller erstatter en del af det native DNA af cellen, om indtastning cellekernen. Denne type celle transfektion fører til omdannelsen af ​​cellen som et resultat af hvilket, der er en gentagelse af DNA-ændringer under mitose.

Forskellige Transfektionsfremgangsmåder

Forskere kan nemt inducere masser af stabil celletransfektion ved at anvende kemiske reagenser og omhyggeligt strukturerede metoder. De er således i stand til at dyrke en cellekultur med en ønsket genetisk ændring. Der er flere andre metoder, hvorigennem de celletransfektioner er udført. Disse består hovedsageligt af de biokemiske Celletransfektion metoder såsom DEAE-dextran, calciumphosphat og liposom-medieret transfektion metoder og fysiske Celletransfektion fremgangsmåder, såsom direkte injektion af mikro materialer, elektroporering og biolistisk levering af partikler. Her har vi kort beskrevet tre transfektionsfremgangsmåder.

DEAE-dextran fremgangsmåde

Denne celletransfektion fremgangsmåde muliggør bindingen af ​​DNA til cellemembranen og post via endocytose. DNA sammen med DEAE-Dextran giver komplekset binding til celleoverfladen. Dette er den eneste metode, som ikke kan anvendes til stabil transfektion.

Elektroporation

I denne celletransfektion metode, højspænding elektriske stød udnyttes med henblik på at indføre DNA i cellerne. Denne proces fører således til en stigning i permeabilitet og den elektriske ledningsevne af plasmamembranen af ​​cellen som følge af et eksternt påført elektrisk stød. Denne celletransfektion metode kan anvendes til stabil transfektion samt.

Liposom-medieret fremgangsmåde

Denne celletransfektion metode gør brug af kationiske lipider, som er fysisk og kemisk ligner de biologiske lipider. Liposommedieret celle transfektionsfremgangsmåder kan bære DNA større end virus, og anses derfor sikrere end virus
.